核酸檢測是第三方檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)中最常見的檢測項(xiàng)目, 直接針對病原核酸進(jìn)行檢測, 核酸檢測特異性強(qiáng)、靈敏度高, 對疾病的診斷起著至關(guān)重要的作用, 但在操作過程中易受到污染, 導(dǎo)致假陽性的結(jié)果, 其中最常見且最難消除的污染為氣溶膠污染,也是困擾大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室的難題。
什么是氣溶膠污染?
氣溶膠污染一般是在提取陽性樣品的核酸或PCR時(shí)使用移液器加樣時(shí)產(chǎn)生, 一個(gè)氣溶膠粒子能攜帶上萬個(gè)DNA 分子, 這些DNA 分子漂浮在空氣中, 難以消除, 部分可附著在檢測人員的衣物上, 隨著人或物的流通而進(jìn)一步污染整個(gè)實(shí)驗(yàn)室, 對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生嚴(yán)重的干擾, 因此解決和監(jiān)控氣溶膠污染是第三方檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)確保檢測結(jié)果質(zhì)量的必由之路。
核酸氣溶膠污染的危害
極微量的核酸氣溶膠污染, 即可形成假陽性。更嚴(yán)重的是,一旦形成氣溶膠污染,則可引起整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)室污染,甚至需要關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室。
另外,核酸氣溶膠污染不僅只影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ,對人的傷害也不容忽視。新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第八版)中明確提出:“在相對封閉的環(huán)境中長時(shí)間暴露于高濃度氣溶膠情況下存在經(jīng)氣溶膠傳播的可能”?梢,實(shí)驗(yàn)人員在進(jìn)行新冠核酸檢測的過程中,若防護(hù)不當(dāng),不慎接觸新冠氣溶膠病毒也易感染新冠肺炎。此外,氣溶膠會(huì)直接對人體的呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等產(chǎn)生很大的損害。
核酸氣溶膠污染應(yīng)如何預(yù)防?
核酸氣溶膠污染不是瞬間的事情,而是一個(gè)累積的過程。如果我們在日常實(shí)驗(yàn)中,就有目地性的規(guī)避,規(guī)范操作,做好清潔消菌,能很大程度上避免核酸氣溶膠污染。
03如果發(fā)生核酸氣溶膠污染,要如何防治?
目前實(shí)驗(yàn)室中,出現(xiàn)核酸氣溶膠污染,常規(guī)處理方法有:酒精擦拭、紫外線照射、高壓變性。值得注意的是,要祛除DNA污染而不是僅僅滅菌的話,常規(guī)紫外線照射建議應(yīng)延長至2小時(shí),即使這樣,紫外照射對祛除小片段(200bp以下)的DNA污染效果仍然不佳。
1、實(shí)驗(yàn)分區(qū)PCR實(shí)驗(yàn)室按《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室管理辦法》(衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號(hào))規(guī)定進(jìn)行分區(qū),工作和空氣流向都嚴(yán)格按照試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→PCR擴(kuò)增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū)。
2、規(guī)范操作實(shí)驗(yàn)過程中,正確穿戴好防護(hù)服,佩戴手套,手套要緊密貼合拇指、食指和中指,避免開蓋操作時(shí)產(chǎn)生交叉污染。
3、常規(guī)操作清潔每天多批次檢測時(shí),在每一批次檢測完以后必須用75%的乙醇或核酸清洗液(如:諾沃賽德核酸污染去除液Novocide Cleaner)進(jìn)行去污處理。
4、重視通風(fēng)不定期對房間進(jìn)行通風(fēng),每次至少持續(xù)30min。PCR擴(kuò)增區(qū)去污染PCR反應(yīng)管必須蓋緊,避免擴(kuò)增后的核酸對環(huán)境的污染。
5、針對PCR實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染問題,在眾多的核酸氣溶膠污染清除技術(shù)當(dāng)中,國內(nèi)設(shè)備中表現(xiàn)較好的有深圳潤聯(lián)生產(chǎn)的比林科漢氣溶膠污染清除儀。 比林科漢氣溶膠污染去除儀的精妙之處在于專業(yè)的解決方案,巧妙利用了特別的干霧設(shè)備+NOVOCIDE AIR核酸污染去除液的完美配合,組成無懈可擊空間消毒方案,避免了過氧化氫蒸汽的腐蝕性和解決了擴(kuò)散性問題。
傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室核酸污染清除方式都存在一定程度的缺陷,而且處理過程人員參與其中,增加二次污染的風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)也大大降低了實(shí)驗(yàn)檢測任務(wù)的進(jìn)行,潤聯(lián)環(huán)保推出的氣溶膠去除劑NOVOCIDE AIR密閉了核酸清除帶來的二次隱患,并充分利用其干霧冷蒸發(fā)設(shè)備,全智能化對實(shí)驗(yàn)室核酸污染進(jìn)行清除,時(shí)間短,效率高。
具備以下特點(diǎn):
1 、同時(shí)對物表及空間氣溶膠核酸污染進(jìn)行全方位清除
2、通常清除時(shí)間控制在2小時(shí)左右
3、可針對實(shí)驗(yàn)室核酸污染預(yù)防及核酸污染后的應(yīng)急處理
4、具備完善的驗(yàn)證方案
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