核酸檢測(cè)不單要注重生物安全的防護(hù),更要注意預(yù)防核酸實(shí)驗(yàn)室的污染,一旦實(shí)驗(yàn)室污染將對(duì)群眾身體健康、環(huán)境、醫(yī)院醫(yī)療體系運(yùn)行、疫情防控形勢(shì)、醫(yī)院經(jīng)濟(jì)及社會(huì)效益生產(chǎn)十分消極的影響
新冠核酸檢測(cè)異常擴(kuò)增曲線
異常擴(kuò)增曲線之一就是“內(nèi)標(biāo)污染”
特點(diǎn):較為常見(jiàn),表現(xiàn)為陰性對(duì)照、生理鹽水,或者試劑空白內(nèi)標(biāo)出現(xiàn)陽(yáng)性擴(kuò)增曲線。
原因分析:
1、操作不規(guī)范,有標(biāo)本殘液或氣溶膠通過(guò)加樣槍、鑷子、手等造成攜帶污染;
2、生物安全柜、實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)、環(huán)境等消毒清潔不到位
異常擴(kuò)增曲線之二“標(biāo)本N/ORF1ab檢測(cè)通道出現(xiàn)S型擴(kuò)增曲線”
特點(diǎn):
一個(gè)或多個(gè)孔N/ORF1ab檢測(cè)通道出現(xiàn)典型或者非典型的S型擴(kuò)增曲線
原因分析:
1、 陽(yáng)性質(zhì)控品處理不夠小心,造成污染。
2、 環(huán)境中熒光物質(zhì),如手套滑石粉等污染,產(chǎn)生非特異熒光信號(hào)。
新冠核酸實(shí)驗(yàn)室污染的表現(xiàn)多為:假陽(yáng)性的漸進(jìn)式、散發(fā)式、突發(fā)式增多,同時(shí)更多的案例表現(xiàn)為陰性對(duì)照出現(xiàn)陽(yáng)性熒光信號(hào)(擴(kuò)增曲線),因此該新冠核酸實(shí)驗(yàn)室極大可能已被污染。
目前核酸實(shí)驗(yàn)室污染的主要類型有:1.標(biāo)本污染;2.試劑污染;3.擴(kuò)增產(chǎn)物污染;4.設(shè)備污染;5.其他污染。
標(biāo)本污染主要是容器被污染、容器密封不嚴(yán)造成樣品被污染等;
試劑污染主要是在體系試劑配制加樣過(guò)程中,由于加樣器、容器、雙蒸水、陰性對(duì)照及其它試劑被PCR核酸模板或陽(yáng)性對(duì)照污染;
擴(kuò)增產(chǎn)物污染主要是PCR實(shí)驗(yàn)室中最主要、最常見(jiàn)的污染。擴(kuò)增產(chǎn)物拷貝量大,極其微量的泄露就可以引起假陽(yáng)性結(jié)果的產(chǎn)生,其形成氣溶膠含長(zhǎng)短不一核酸片段小顆粒,沉降到操作臺(tái)面、擴(kuò)增儀等物體及空氣中造成擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)或者實(shí)驗(yàn)室大面積的污染;
設(shè)備污染主要是儀器接觸了PCR核酸模板、陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物未清除或無(wú)法清除造成的污染,其往往表現(xiàn)為特定的孔位假陽(yáng)性,同一區(qū)域的其他環(huán)境監(jiān)測(cè)點(diǎn)(如:操作臺(tái)面、空氣等)多為陰性結(jié)果;
其他污染主要是不明污染原因的污染,因此該新冠核酸實(shí)驗(yàn)室可能為擴(kuò)增產(chǎn)物污染污染。
污染源清除方法:
核酸檢測(cè)每批次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)嚴(yán)格按以下消毒順序進(jìn)行為期7天的清潔消毒。
1.清洗空調(diào)過(guò)濾網(wǎng);
2.75%酒精對(duì)污染區(qū)域空氣進(jìn)行噴霧(確保安全的前題下);
3.使用PCR Cleaner對(duì)擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)儀器設(shè)備(如基因擴(kuò)增儀擴(kuò)增倉(cāng)與外表等)擦拭;
4.新鮮配制1000 mg/L有效氯84消毒液分別擦拭工作臺(tái)面、冰箱和傳遞窗把手;
5.作用10min后用清水擦拭上述儀器設(shè)備及工作臺(tái)面等物表;
6.新鮮配制1000 mg/L有效氯84消毒液拖擦地面,打開(kāi)實(shí)驗(yàn)室紫外燈照射≥1h;
7.保持開(kāi)窗通風(fēng)排氣。
實(shí)施污染源清除驗(yàn)證:
按照污染源清除方法對(duì)擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)實(shí)行7天清潔消毒去污染源后,對(duì)該區(qū)域的操作臺(tái)面、熒光定量基因擴(kuò)增儀擴(kuò)增倉(cāng)、空氣等環(huán)境監(jiān)測(cè)點(diǎn)連續(xù)3天核酸監(jiān)測(cè),連續(xù)3天檢測(cè)核酸陰性,判定為污染源清除成功,實(shí)驗(yàn)室可正常使用運(yùn)行
近年來(lái),化學(xué)消毒劑與物理技術(shù)相結(jié)合的過(guò)氧化氫消毒干霧新技術(shù)已在國(guó)外逐漸應(yīng)用并引入我國(guó)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)認(rèn)證,該消毒技術(shù)在環(huán)境消毒效果、與物體的兼容性、安全環(huán)保性均具有良好性能。比林科漢核酸去除儀+過(guò)氧化氫殺孢子劑(高純低濃度)的完美配合,組成無(wú)懈可擊空間消毒方案,高效分解DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物質(zhì),適用核酸實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染。